扼制菌性能构件层析解离技艺

　　木叶抑菌活性物的提取用乙醇作提取溶剂，L9正交表设计正交实验。木叶粉加入定量溶剂回流提取，滤液减压缩至含生药浓度1g/mL），检测各提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌生长的抑制活性，经方差分析得最佳提取条件。

　　木叶提取物的柱层析用大孔吸附树脂、离子交换树脂、硅胶、聚酰胺树脂制备层析柱。取最佳抑菌活性的木叶提取物上柱，依次用水、30乙醇、60乙醇、90乙醇洗脱，分别收集洗脱液，浓缩至含生药浓度1g/mL后进行抑菌实验，选择最佳抑菌效果的树脂与洗脱部位。

　　化学定性检识将聚酰胺柱层析水洗脱液、90乙醇洗脱液用化学试剂进行定性检识，为进一步分离纯化研究提供依据。木叶抑菌成分的提取表2、3为正交试验各提取物的抑菌结果，直观数据分析表明，R3>R1>R2，即因素C（提取时间）的影响最大，A（溶剂浓度）、B（提取温度）次之，最佳条件为A2B1C2，即60乙醇、45℃、2h。方差分析结果表明，因素A、B、C影响无显著性差异，均方离差可见因素影响的主次顺序仍为C、A、B，结果提示在木叶抑菌成分提取时乙醇浓度、提取时间与温度均应适当控制。

　　水洗脱液所含香豆素在90乙醇洗脱液中未检测出；90乙醇洗脱液所含皂苷、黄酮类则未从水洗脱液中检到；90乙醇洗脱液中生物碱、酚类和鞣质类含量较高。结合水洗脱液抑菌活性明显高于90乙醇洗脱液的试验结果分析木叶多种化合物具抑菌活性，其中香豆素可能为高抑菌活性物质，见5。

　　抑菌活性成分柱层析分离结果表明：聚酰胺树脂对木叶抑菌活性物吸附及解吸作用较佳，其以水洗脱液的抑菌效果较好，对三种菌均有很强的抑制作用；大孔吸际树脂柱层析中水洗脱液对金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌生长的抑制作用最强，但对大肠杆菌无抑制作用；硅胶、离子交换树脂柱层析几种洗脱液抑菌效果相对较差，提示木叶高抑菌活性集中在大孔吸附树脂和聚酰胺树脂柱的水洗脱部位，乙醇洗脱部位的抑菌活性很弱，其是否与水洗脱部位为同类物质有待研究。

　　木叶最佳条件提取物过聚酰胺柱、抗心律失常、抗血栓形成、抗过敏性疾病等多种功能，对木叶中香豆素类化学组分与功能的研究尚待深入。该试验还提示90乙醇洗脱液中的生物碱、酚类、鞣质、皂苷、黄酮类抑菌活性较低，其是否与提取方法、产地有关，拟深入研究。